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Milo

Milo™ System

Single-Cell Western platform

  • 1,000 개 이상의 단일 세포에 대해 Western 기반의 단백질 분석
  • 단 1 mL의 시료로 Protein expression heterogeneity 분석과 세포 내 Subpopulation 확인
  • 최대 4 개의 단백질 표적에 대한 Multiplexing 가능
  • Flow cytometry 에서는 분석이 어려운 Intracellular protein (Phosphorylated target, Transcription factor, and Protein isoform) 검출 가능

ico_chk01  1,000 개 이상의 단일 세포에 대해 Western 기반의 단백질 분석

ico_chk01  단 1 mL ( >104 Cells) 의 시료로 Protein expression heterogeneity 분석과 세포 내 Subpopulation 확인

ico_chk01  FACS 에서는 분석이 어려운 Intracellular protein (Phosphorylated target, Transcription factor) 과 Protein isoform 검출 가능

ico_chk01 최대 4 개의 단백질 표적에 대한 Multiplexing 가능

ico_chk01 빠르고 간단한 분석 과정 (Total workflow: 4-6 hours, Hands-on time: 1-2 hrs)

 

ico_chk01  scWest Chip은 6,400개 micro-well 이 포함된 Photoactive polyacrylamide gel이 내장 되어, 1000개 이상의 Single cell을 포획할 수 있음

ico_chk01  Milo는 Cell lysis, SDS-PAGE separation, UV immobilization step을 포함하여 Chip을 작동시키는 데 필요한 핵심 분석 단계를 단 5분만에 자동화함

 

 

 

 

 

ico_chk01  Target expression heterogeneity of tumors

ico_chk01  Identify differentiated stem cell subtypes

ico_chk01  Intracellular signaling pathway activation

ico_chk01  Histone modification

ico_chk01  Validating single cell RNA-seq data

 

[Application Note]

Protein Expression Heterogeneity with Milo, the First Single-Cell Western System >>

Adapting the Single-Cell Western Protocol to Detect Histone Modifications >>

Using Single-Cell Westerns to Validate Single-Cell RNA-Seq Data >>

Identify and Quantify Neural Subtypes with Single-Cell Westerns >>

Description Specification
Sample volume required  1 mL
Sample type  Suspension containing >10,000 cells
Cell diameter  7-25 µm
Cell type  Mammalian cells; globular in suspension and unfixed
Antibody requirement  Standard, commercial unlabeled primaries and fluorescent secondaries
Other equipment needed  Open-format fluorescence microarray scanner capable of 10 µm resolution
Molecular weight (MW) range  15-175 kDa
MW resolution  10% differences in distinct spectral channels, as low as 30% differences in same spectral channel
Typical target multiplexing  Up to 4 proteins per cell
Dynamic range  3 logs
Quantitation CV  < 6%