ID7000

Sony ID7000

– 최대 7 Laser & 186 개의 검출기 장착 시 50개 형광 동시 분석 가능
– 고감도 detector 장착, 0.1um의 small particle detection 가능
– 형광 고유 spectrum 정보기반, 인접한 형광 영역까지 순수 분리 가능
– Autofluorescence 제거로 false positive 제거가능
– Spectral library에 single control 저장 후 반복 사용 가능

Spartially separated 7-lasers

기본 3-laser (405nm/488nm/637nm)구성에서 7-laser까지 flexible laser upgrade 가능
Yellow-green (561nm), ultraviolet (355nm), deep ultraviolet (320nm), and infrared (808nm) 중 선택

Spectral data & Enhanced Sensitivity

고감도 detector 장착으로 0.1㎛ small particle 측정가능 (rare & dim population detection 가능)
186개의 고감도 PMT array를 사용하여 360nm ~ 920nm의 모든 파장을 측정 (5-laser, 147개 PMTs 장착)
32-channel PMT arrays와 개별 PMT array를 이용하여 매우 인접한 형광 분리 가능 (800nm 이상 signal은 InGaAs PMT 이용)

Flexible panel design & High parameter data

브랜드 상관없이 모든 형광 사용 가능
각 형광의 모든 excitation 값 측정하여 형광데이터 보정하므로 정확한 형광 분리 가능 (예: 5-laser, 42 color)

Auto-Sampler & Auto acquisition

5 mL tube (최대 24개), 96 & 384 well plate 사용 (온도 설정 가능)
Auto acquisition 모드 사용 시 사용자 숙련도에 따른 에러 최소화
Probe 자동 세척으로 Bubbles, clogs로 인한 에러 최소화

차별화된 Spectral unmixing 기능

Fluorochrome signal의 손실 없이 파장이 겹치는 형광물질도 동시 분석 가능
각 파장의 형광 intensity와 reference를 기반으로 인접한 형광 영역까지 순수 분리 가능
복잡한 color compensation 과정이 없이 다양한 형광 패널 조합 사용 가능
Single control을 spectral library 저장 후 반복하여 사용 가능

Spectral technology를 이용한 autofluorescence 제거

Pyridine (NAD/NADH), Flavin (FMN, FAD) 및 기타 세포 내 산화 반응에 의해 생성된 autofluorescence를 제거하여 정확한 세포 분석이 가능
여래 개의 autofluorescence 선택 후 제거 가능
염색되지 않은 whole blood sample 내 autofluorescence 비교 가능

(A) 그림은 AF1, AF2, AF3을 기준으로 각 population의 spectral ribbon plot을 보여주며, 분석과정에서 얻은 spectral finger prints를 바탕으로 autofluorescence를 제거하므로 형광에 대한 정확한 결과 분석이 가능함.

(B) 그림은 (A)와 동일한 샘플로 parametric 값을 보여준다. (i)는 AF1, AF2, AF3 각 영역에서의 autofluorescence 값을 포함한 상태에서의 parametric 값을 보여주며, (ii)는 각 AF1, AF2, AF3을 기준으로 autofluorescence 영역을 제거하였을 시 parametric 값을 나타냄.

시스템 성능 최적화를 위한 자동화 설정 및 Daily QC Mode

Align Check 및 Performance QC 수행하여 기기 최적화 (20min 이내)

Unmixing Viewer 기능

기존 방식: 16개의 형광 분석 시 15*15, 225개 그래프 필요, compensation 조절 어려움
Unmixing viewer 이용 시 하나의 형광 값 기준으로 연관된 모든 Plot 동시 비교 가능, compensation 및 background 조절 용이

누구나 쉽게 사용할 수 있는 simple workflow

Acquisition workflow 탭을 선택하면 샘플 수집 관리에 필요한 정보가 표시

Acquire/Status panel: 데이터 획득을 위한 매개 변수 표시, Export/import 설정, 샘플 acquisition 관련 정보 표시
Experiment: 사용 가능한 experiment, 템플릿과 experiment 기본 정보 표시
샘플 레이아웃 (플레이트) : 샘플 수집 관련하여 선택한 레이아웃의 시각적 정보 표시
Worksheet : 데이터 표시 및 작업 공간
Gates and Statistics: 수집된 데이터에서 자동으로 계산된 통계치 표시
Stopping Condition Window: 사용자가 데이터 수집 기준 선택
Persistent Footer : 광학 (레이저) 및 플루이딕 (시스 및 폐기물) 상태 표시

Instrument Specifications

Optics /Performance	Item	Specifications
	Excitation lasers	320 nm, 355 nm, 405 nm, 488 nm, 561 nm, 637 nm, 808 nm
	Detectors	Photomultiplier tubes (32-channel PMTs, single-channel PMTs, and single-channel IR-sensitive PMTs)
	Fluorescence sensitivity (molecules of equivalent soluble fluorochrome) *	FITC ≤ 58 MESF; PE ≤ 4 MESF; APC ≤ 7 MESF *Specifications listed are an average of data obtained from multiple systems.
	Pulse parameter	Area, Height, Width (all channels)
	Signal resolution	Height (20 bit), Area (32 bit) Sampling frequency: 60 MHz
	Detectable particle size	160 nm with SSC
	Fluorescence resolution	CV < 3% for the singlet peak of propidium iodide-stained Chicken Erythrocyte Nuclei (CEN)
	Event rate	40,000 events per second
Fluidics	Sample flow rate	~33 μL/min–200 μL/min
	Cleaning modes	Priming, Probe Wash, Flow Cell Purge, Decontamination (with bleach), Hardware Shutdown (performed before system shutdown), Automatic Shutdown (programmed system shutdown after completion of Auto Acquisition)
	System fluidics	10-L capacity Sheath Tank and 10-L Capacity Waste Tank, Sheath fluid (distilled water or phosphate buffered saline)
System software	Software	ID7000 Acquisition and Analysis Software
System software	Supported file types	exdat and FCS 3.1
AutoSampler	Sample loading options	Multiwell plates: 96-well plate: standard height flat/V/U bottom, 96-well half deep V bottom, 96-well deep U bottom, 384-well standard flat bottom
	Sample loading options	Tubes: 24-tube rack that accommodates 5-mL (12 x 75-mm) polystyrene/polypropylene tubes
	Minimum sample volume*	5-mL tube: 100 μL in standard mode/50 μL in low-volume mode
		96-well plate: 55 μL in standard mode/10 μL in low-volume mode
		384-well plate: 40 μL in standard mode/10 μL in low-volume mode
		*Minimum volumes provided for the sample vessel type are averages of data obtained from multiple experiments.
	Carryover	< 0.1% (when measured with inner and outer Probe Wash)
	Throughput	96-well plate in 19 minutes (Based on an acquisition time of 2 seconds per well, no agitation, and no probe wash. The value reported is an average of multiple experiments.)
	Sample agitation	Multiple mixing modes: Once at the beginning of acquisition, Cyclic, or Continuous Mixing
	Temperature control	From ambient temperature to 4°C with a Peltier sample cooling module

Laser configuration

Model	No. of lasers, wavelength	No. of detectors*	Colors
LE-ID7000A	3LD: 405/488/637	FSC/SSC + 86F	22
LE-ID7000B	4LD: 405/488/561/637	FSC/SSC + 112F	27
LE-ID7000C	5LD: 355/405/488/561/637	FSC/SSC + 147F	42
LE-ID7000D	6LD: 355/405/488/561/637/808	FSC/SSC + 149F	44
LE-ID7000E	6LD: 320/355/405/488/561/637	FSC/SSC + 182F	50
LE-ID7000F	7LD: 320/355/405/488/561/637/808	FSC/SSC + 184F	52